92.咳嗽变异性哮喘2（2 / 4）

这两样工作对个人的操作要求很高，就拿细胞融合来讲，需要先把脾细胞与 1×10^7骨髓瘤细胞 SP2/0混合于一支 50 ml融合管中，补加不完全培养基至 30 ml，充分混匀。

再用离心机以1000转/min离心 5-10分钟，将上清尽量吸净。

在手掌上轻击融合管底，使沉淀细胞松散均匀；

用 1 ml吸管在 30s内加入预热的 50% PEG1 ml，边加边轻轻搅拌。

吸入吸管静置 1 min。

加入预热的不完全培养液，终止 PEG作用，连续每 2 min内分别加入 1 ml，2 ml，3 ml，4 ml，5 ml，10 ml.

800rpm，5分钟；弃去上清。

加入 5 ml完全培养基，轻轻吹吸沉淀细胞，使其悬浮并混匀，然后补加完全培养基至 40-50 ml。分装 96孔细胞培养板，每孔 100ul，然后将培养板置 37℃，5% CO2培养箱内培养。

6 h后补加选择培养基。每孔 50ul. 3天后用选择培养基半换液。

经常观察杂交瘤细胞生长情况，待其长至孔底面积 1/10以上时吸出上清供抗体检测。

这些步骤写出来都觉得麻烦，何况是做起来呢。高风和李友良耐着?子每天练习到很晚，但是总感觉效率很低。

“还是把嘉然和程松喊过来了吧。”高风心里大概算了算，照这个情况，2个人到时候累死也干不过来。

“人还是太少了！”李友良跟高风说，“以后看能不能再拉几个人。”

“等出成果了再说吧，现在估计喊谁都不合适。”高风也想过这事，不过觉得急不来，目前整个团队都是为爱发电，人少还行，人一多就不好管理了。

科研实验中很怕出现撂挑子的情况，一般关键的环节至少要有2个人一起负责，以免出现意外的情况导致实验进程中断。

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